Expression of LIN28A/B and Let-7 miRNAs in canine mammary carcinomas / Expressão de LIN28A/B e Let-7 miRNAs em carcinomas mamários caninos

LIN28 is a RNA-binding protein including two highly conserved homologous, LIN28A and LIN28B. Proto-oncogenes such as LIN28A and LIN28B are generally targeted by the let-7 miRNAs in different types of human cancers. Here, we determined the expression of LIN28A in canine mammary tumor samples and the LIN28/let-7 pathway in canine mammary cell lines. In those cell lines, we identified a functional LIN28/let-7 pathway which exhibited high expression of let-7 members and low expression of its targets, including LIN28A and LIN28B. However, the mammary carcinoma tissue samples showed a frequent expression of LIN28A being expressed mainly in the epithelial cells. No association was observed between LIN28A expression and histopathological classification and grade, TNM and survival time. Our results suggested a possible role of the LIN28A protein in the development of canine mammary carcinomas due to the high frequency observed in the tumor samples (28 of 32). The in vitro experiments suggested that the LIN28/let-7 pathway is active in the tumor cells evaluated. However, more studies are necessary to elucidate the exact role of LIN28/let-7 pathway in canine mammary carcinomas.

LIN28 é uma proteína de ligação ao RNA, com duas formas homólogas altamente conservadas, LIN28A e LIN28B. Os proto-oncogenes LIN28A e LIN28B são regulados pela família de miRNAs let-7 em diferentes tipos de cânceres em humanos. No presente trabalho, o objetivo foi determinar a expressão de LIN28A em amostras de tumor mamário de cadelas e a via LIN28/let-7 em linhagens celulares mamárias caninas. Nestas linhagens, através das técnicas de qPCR e RNAseq, foi identificado que a via LIN28/let-7 apresenta-se funcional, com alta expressão dos membros da família let-7 e baixa expressão de seus alvos, entre eles LIN28A e LIN28B. No entanto, as amostras de tecidos de carcinomas mamários caninos demonstraram expressão frequente de LIN28A, sendo observada principalmente em células epiteliais. Não foram observadas associações entre expressão de LIN28A com classificação e gradação histopatológicas, TNM e tempo de sobrevida. Nossos resultados sugerem uma possível relação da proteína LIN28A no desenvolvimento de carcinomas mamários caninos devido à alta frequência observada nas amostras tumorais (28 de 32). Os experimentos in vitro sugerem que a via LIN28/let-7 é ativa nas linhagens celulares caninas avaliadas. Entretanto, estudos funcionais ainda são necessários para elucidar a função exata da via LIN28/let-7 nos carcinomas mamários caninos.

Caffeine increases Nr1i3 expression and potentiates the effects of its ligand, TCPOBOP, in mice liver / A cafeína aumenta a expressão Nr1i3 e potencializa os efeitos do seu ligando, TCPOBOP, em fígado de camundongos

Caffeine is one of the world's most consumed substances. It is present in coffee, green tea and guarana, among others. The xenobiotic-sensing nuclear receptor subfamily 1, group I, member 3 (Nr1i3), also known as the Constitutive Androstane Receptor (Car) is a key regulator of drug metabolism and excretion. No consistent description of caffeine effects on this receptor has been described. Thus, to unravel the effects of caffeine on this receptor, we performed experiments in mice. First, C57Bl/6 mice that were treated daily with caffeine (50 mg/kg) for 15 days presented a slight but significant increase in Nr1i3 and Cyp2b10 gene expression. A second experiment was then performed to verify the effects of caffeine on TCPOBOP (1,4-bis-[2-(3,5-dichloropyridyloxy)]benzene, 3,3′,5,5′-tetrachloro-1,4-bis(pyridyloxy)benzene), the most potent agonist known for mice Nr1i3. Interestingly, caffeine potentiated TCPOBOP pleiotropic effects in mice liver, such as hepatomegaly, hepatotoxicity, hepatocyte proliferation and loss of cell-to-cell communication through gap junctions. In addition, caffeine plus TCPOBOP treatment increased liver gene expression of Nr1i3 and Cyp2b10 comparing with only caffeine or TCPOBOP treatments. Together, these results indicate that caffeine increases the expression of Nr1i3 in mice liver, although at this point it is not possible to determine if Nr1i3 directly or indirectly mediates this effect...

A cafeína é uma das substâncias mais consumidas mundialmente, estando presente no café, chá-verde e guaraná, entre outros. O receptor sensor de xenobióticos Receptor Nuclear subfamília 1, grupo I, membro 3 (Nr1i3, mais conhecido como Androstano Consititutivo - Car) é um regulador chave da biotransformação e excreção de substâncias e nenhuma descrição consistente dos efeitos da cafeína sobre este receptor foi feita. Então, para avaliar os efeitos da cafeína sobre este receptor, realizamos experimentos em camundongos. Primeiramente, camundongos C57/Bl/6 foram tratados diariamente com cafeína (50 mg/kg) por 15 dias e apresentaram um leve, mas significativo, aumento na expressão do Car e do seu gene alvo Cyp2b10. Assim, um segundo experimento foi realizado para verificar os efeitos da cafeína sobre o TCPOBOP (1,4-bis-[2-(3,5-dicloropiridiloxi)]benzeno,3,3′,5,5′-tetracloro-1,4-bis(piridiloxi)benzeno), o mais potente agonista do Nr1i3 de camundongos conhecido. Interessantemente, a cafeína potencializou os efeitos pleiotrópicos do TCPOBOP no fígado dos camundongos, como hepatomegalia, hepatotoxicidade, proliferação celular e perda da comunicação intercelular por junções do tipo gap. Os camundongos tratados com cafeína e TCPOBOP apresentaram maior expressão gênica de Nr1i3 e Cyp2b10, quando comparados aos camundongos tratados apenas com cafeína ou TCPOBOP. Juntos, nossos resultados indicam que a cafeína aumenta a expressão do receptor CAR em fígados de camundongos C57/Bl/6, porém nesta etapa ainda não é possível afirmar se estes efeitos são direta ou indiretamente mediados pelo Nr1i3...

Chemical carcinogenesis by DMBA (7, 12-dimethylbenzanthracene) in female BALB/c mice: new facts / Carcinogenese quimica por DMBA (7, 12-dimethylbenzanthracene) em camundongos femeas BALB/c: novos fatos

Polycyclic aromatic hydrocarbons are known carcinogens used in rodent experimental models. In this study, the carcinogen DMBA (7,12-dimethylbenzanthracene) was administered by gavage, diluted in corn oil, to female BALB / c mice at hebdomadary doses of 1 mg per animal for 1, 3, 6 or 9 weeks. Animals were weighed and monitored weekly until death. Remaining animals were euthanized at the age of 53 weeks. At necropsy, representative fragments of neoplasms were collected and routinely processed for histopathological analysis. Of all mice that received DMBA, 68.57% developed some type of tumor. Of the 70 mice treated with various doses of DMBA, 22 (31.43%) developed mammary tumors. The adenoacanthoma was the most commonly (18.75%) diagnosed histological type of breast cancer. Lung (15.71%), lymphoid tissue (11.43%), stomach (7.14%) and skin (2.86%) were also primary sites of tumor development. One third (33.33%) of the mice receiving 1 mg of DMBA developed lung cancer. Therefore, the administration of DMBA was shown to be an efficient model of carcinogenesis in mice, especially for the study of breast cancer, when using the highest dose, and lung, when using the lowest dose. Carcinogenesis models have been used for several purposes in cancer research. These results represent new facts for a classic carcinogenesis model.

Hidrocarbonetos policíclicos e aromáticos são carcinógenos usados em modelos experimentais em roedores. Neste estudo, o carcinógeno DMBA (7,12-dimetilbenzantraceno) foi administrado por gavagem, diluído em óleo de milho, para camundongos BALB/c em doses hebdomadárias de 1 mg por animal por 1, 3, 6 ou 9 semanas. Os animais foram pesados e monitorados semanalmente até a morte. Os animais remanescentes foram eutanasiados com a idade de 53 semanas. Na necroscopia, fragmentos representativos das neoplasias foram colhidos e rotineiramente processados para exame histopatológico. De todos os animais que receberam DMBA, 68,57% desenvolveram algum tipo de tumor. Entre os 70 camundongos tratados com diferentes doses de DMBA, 22 (31,43%) desenvolveram neoplasias mamárias. O adenoacantoma foi o tumor mamário mais comumente diagnosticado (18,75%). Pulmões (15,71%), tecido linfoide (11,43%), estômago (7,14%) e pele (2,86%) foram também locais primários de desenvolvimento de neoplasias. Um terço (33,33%) dos camundongos que receberam 1 mg de DMBA desenvolveram neoplasias pulmonares. Portanto, a administração de DMBA foi considerada um modelo eficiente de carcinogênese em camundongos, especialmente para o estudo de neoplasias mamárias, quando a maior dose é utilizada, e de neoplasias pulmonares, quando utilizada a menor dose. Os modelos de carcinogênese química têm sido usados para diversos estudos na pesquisa em câncer, os resultados aqui apresentados mostram novos fatos para um modelo clássico de carcinogênese.

Selenium and vitamin E enriched diet increases NK cell cytotoxicity in cattle / Dieta enriquecida com selênio e vitamina E aumenta a citotoxicidade de células NK em bovinos

A number of studies has shown that antioxidants, fatty acids and trace minerals may modulate different immune cell activities, and that their deficiency may be associated with diseases and impaired immune responses. In innate immunity, natural killer (NK) cells have a central role, killing virally infected and cancerous cells, and also secreting cytokines that shape adaptive immune responses. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of enriched diets in selenium plus vitamin E and/or canola oil on complete blood count and on NK cell cytotoxicity from blood lymphocytes of Nellore bulls. Bulls that received selenium plus vitamin E had (P=0.0091) higher NK cell cytotoxicity than control bulls. This result positively correlated with serum selenium levels. To the best of our knowledge, this is the first study that showed immunostimulatory effects of selenium plus vitamin E on NK cell cytotoxicity of Nellore bulls.(AU)

Vários estudos demonstraram que antioxidantes, ácidos graxos e minerais podem modular a atividade de diferentes células do sistema imunológico e que as suas carências podem estar associadas a doenças e a respostas imunes comprometidas. Na imunidade inata, os linfócitos natural killer (NK) têm um papel central matando células infectadas por vírus e células cancerígenas, ao mesmo tempo em que também secretam citocinas que modulam as respostas imunes adaptativas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de dietas enriquecidas em selênio e vitamina E e/ou óleo de canola no hemograma e na citotoxicidade das células NK do sangue de bovinos da raça Nelore. Os animais que receberam selênio e vitamina E tiveram (P = 0,0091) maior citotoxicidade das células NK do que os animais do grupo controle. Este resultado foi positivamente correlacionado com os níveis de selênio no sangue. Para o melhor do nosso conhecimento, este é o primeiro estudo que mostrou efeitos imunoestimulatórios do selênio e vitamina E sobre a citotoxicidade das células NK de bovinos Nelore.(AU)

Fitoterápicos e potenciais interações medicamentosas na terapia do câncer / Possible herb-drug interactions in cancer treatment

Cancer treatment has been considered one of the most challenging problems of modern medicine. From the moment that the primary tumor metastasizes through the body, the prognoses turns to poor and the chemotherapy is considered the main choice of treatment in this stage. One positive point of chemotherapy is the access to the majority of metastasis. Yet, it presents several disadvantages frequently related to adverse effects, since a great number of chemotherapeutic drugs present a low therapeutic dosage, generally close to the toxic dose. On the other hand, several natural products have emerged to treat cancer, increasing their consumption in the western world. Although some plants have demonstrated antitumoral effects in preclinical models, one key problem is when these plants are consumed together with the prescribed conventional chemotherapy, possibly leading to herb-drug interactions. Our goal here is to alert that arbitrary or even prescribed consumption of these herb-based substances along with conventional chemotherapeutic drugs might generate herb-drug interactions, increasing the side-effects, toxicity or even decreasing the antineoplastic effect. We will discuss important topics, as the role of the xenobiotic receptors. At last, we review the published data concerning the most consumed medicinal plants used in Brazil and their potential for herb-drug interactions.

Atualmente o tratamento dos cânceres, em sua grande maioria, é considerado como um dos problemas mais desafiadores da medicina. A partir do momento que a neoplasia primária metastatiza pelo corpo do hospedeiro o prognóstico se torna extremamente ruim, sendo a quimioterapia antineoplásica a principal forma de tratamento neste estágio. Uma vantagem deste tratamento é o de atingir as metástases disseminadas pelo corpo. Entretanto, há desvantagens importantes a serem consideradas principalmente aquelas relacionadas aos seus efeitos colaterais, pois em sua grande maioria estes medicamentos apresentam baixo índice terapêutico, ou seja, dose terapêutica muito próxima a dose tóxica. Por outro lado, vários fitoterápicos têm surgido com opropósito de tratar câncer, aumentando seu consumo no mundo ocidental. Embora algumas destas plantas tenham apresentado efeitos antineoplásicos em estudos pré-clínicos, é importante ressaltar que quando consumidas simultaneamente com os medicamentos convencionais prescritos podem causar intoxicações devido à interações medicamentosas. Desta maneira, o objetivo desta revisão é alertar que o consumo destas formulações à base de plantas em conjunto com quimioterápicos antineoplásicos pode acarretar em interações medicamentosas, aumentando assim os efeitos colaterais, a toxicidade ou até mesmo diminuindo a eficácia do tratamento. Serão discutidos tópicos importantes sobre o tema, como o papel de receptores xeno-sensores e por fim uma breve revisão sobre as informações já publicadas, referentes aos principais fitoterápicos utilizados no Brasil no que concer e às interações medicamentosas.